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标题: 【夯实基础】液相色谱定量分析原理 [打印本页]

作者: xiaoxiao 时间: 2015-5-22 06:55 AM
标题: 【夯实基础】液相色谱定量分析原理
本帖最后由 xiaoxiao 于 2015-5-22 06:57 AM 编辑
【夯实基础】液相色谱定量分析原理
2015-05-21 仪器信息网
液相色谱定量分析原理
在定性的基础上定量,需有纯物质作为标准物液相色谱定量是相对定量的方法:即由已知量的纯标样推算混合物中被测物的量定量的依据是:

被测组分的量与响应值(峰高或峰面积)成正比

- G! s4 v1 H; q# V3 I5 Z

由已知量的标样可求得定量校正因子

( j& K6 b& `( T7 v

定量校正因子:是定量计算公式中的比例常数,其物理意义是单位响应值(峰面积)所代表的被测组分的量

4 O) g1 e' Y: K% ?9 y T0 h

测定未知组分的响应值,通过定量校正因子即可求得其含量
( f. j5 ^7 F5 N( T$ H3 c1 Y+ i! \

液相色谱定量分析的步骤

1、选择一个适合定量分析的色谱方法：

确认被检测组分峰,并达到分离度(R)大于1.5
确定被测组分色谱峰的一致性(纯度)
: ]; ~( h2 X" Z% U4 v( Q1 f
" b; b0 |1 l$ D9 Q- `

确定方法的检测限及定量限;灵敏度及线性范围$ I P# j0 q1 R2 W- N1 }, P- S

! d5 b6 u, a7 Y0 W

2、用不同浓度的标准样品建立校正曲线* M5 p5 P) `  O
3、考查定量方法的准确度及精密度
! M- f' q% n" x" z; Y4、用相应的色谱管理软件实施样品采集,数据处理及报告结果
. l0 g! W. R6 v3 J" Q鉴别需定量的色谱峰(定性)
定性鉴别每个要定量的色谱峰
' u# U' q+ Y& |: U" S首先用标样确定欲定量之色谱峰的保留时间(Rt)，通过比较保留时间,找到未知样中各色谱峰所对应的组份，色谱定性是用与标样比较保留时间的方法，判据并不充分进一步的确认(定性)1、标准加入法* J( M; X0 K3 z; c' N+ H
2、同时用其它方法：其它色谱方法(改变机理,如:用不同的色谱柱) 、其它检测器（PDA：光谱图比较、谱库检索；MS：质谱图解析、谱库检索）3、其它仪器方法  W# d7 \+ }9 G( d( f4 ]7 m
确认定量峰的一致性
确认色谱峰的一致性(纯度)
, }' @; m( v/ D. z  Z3 U

保证每个色谱峰下只有一个被测的组份# I: A) X6 Z% \; v

4 p, q; e' u0 s Q

检查是否有共流出的物质（杂质）干扰
. [. T4 ?5 V; v+ v* D

% Z& v. F3 g* ^9 @: j) A

色谱峰一致性(纯度)确认的方法8 q0 Y' B* @" M& ?4 |

用光电二极管矩阵(PDA)检测器比较光谱图
. m! Z" G, u8 n; A2 a# w* W

" e: L8 ~' j9 N0 I* p, c

峰纯度鉴定
% Q+ M% `6 ?. ~' b, v
+ T: ]+ k8 }" r3 N3 W0 @

2996的纯度角理论

' `. L6 J0 u7 r7 v- ^. b

常用的定量方法
标准曲线法,分为外标法和内标法:0 y8 |2 G; C! |8 |! V% C' k

外标法：在液相色谱中用得最多

内标法：准确，但是麻烦，在标准方法中用得最多

影响定量分析结果的因素

准确度不好可能由下述原因造成:

–峰面积积分不正确、样品分解或制样时导入杂质、样品瓶不密封,样品或溶剂挥发、制样不正确、进样问题、内标制备不正确

精密度不好可能的原因:

峰积分不正确、进样或进样器有问题、样品分解或制样时引入了杂质、色谱问题、检测器响应下降

文章来源：百度文库

作者: gongcl 时间: 2015-5-22 10:12 AM
谢谢分享

作者: 桂灵芝 时间: 2015-5-22 10:35 AM
谢谢分享！

作者: 黑龙 时间: 2015-5-22 12:12 PM
谢谢分享！

作者: ruichao2005 时间: 2015-5-24 05:20 PM
学习一下！！！！！

作者: 幻想家-13金 时间: 2015-5-25 11:25 AM
感谢分享！！！！！！

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