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标题: 【夯实基础】液相色谱定量分析原理 [打印本页]

作者: xiaoxiao 时间: 2015-5-22 06:55 AM
标题: 【夯实基础】液相色谱定量分析原理
本帖最后由 xiaoxiao 于 2015-5-22 06:57 AM 编辑
【夯实基础】液相色谱定量分析原理
2015-05-21 仪器信息网
液相色谱定量分析原理
在定性的基础上定量,需有纯物质作为标准物液相色谱定量是相对定量的方法:即由已知量的纯标样推算混合物中被测物的量定量的依据是:

被测组分的量与响应值(峰高或峰面积)成正比
! N5 R4 ?# H, P, a& R p! i/ Y

由已知量的标样可求得定量校正因子
, J) B2 B- }" R

定量校正因子:是定量计算公式中的比例常数,其物理意义是单位响应值(峰面积)所代表的被测组分的量
! S L0 q+ t9 Y

测定未知组分的响应值,通过定量校正因子即可求得其含量
+ U6 I% `) c$ b3 i1 D! Q9 [3 ^

液相色谱定量分析的步骤

1、选择一个适合定量分析的色谱方法：

确认被检测组分峰,并达到分离度(R)大于1.5
确定被测组分色谱峰的一致性(纯度)
" j( U3 s( X: o5 w0 G

7 P5 c+ Y1 S P2 W4 l. v" J, o: d

确定方法的检测限及定量限;灵敏度及线性范围
9 e3 J+ k' s1 Q5 ~" x( T
4 f3 U* D( q: i; ?/ j+ A: J8 J! R

2、用不同浓度的标准样品建立校正曲线
5 `4 x" }9 h" {/ {; h; w3 B3、考查定量方法的准确度及精密度6 z) E: ^, X1 B% G
4、用相应的色谱管理软件实施样品采集,数据处理及报告结果- g) t2 _1 E; Y( _. U
鉴别需定量的色谱峰(定性)
定性鉴别每个要定量的色谱峰% L2 q1 b7 c' O- h) D% }5 P
首先用标样确定欲定量之色谱峰的保留时间(Rt)，通过比较保留时间,找到未知样中各色谱峰所对应的组份，色谱定性是用与标样比较保留时间的方法，判据并不充分进一步的确认(定性)1、标准加入法$ f9 L3 ]1 j9 T: _0 x/ b b
2、同时用其它方法：其它色谱方法(改变机理,如:用不同的色谱柱) 、其它检测器（PDA：光谱图比较、谱库检索；MS：质谱图解析、谱库检索）3、其它仪器方法& _: F9 ~* U% P' \. ^, c% c
确认定量峰的一致性
确认色谱峰的一致性(纯度)1 X' x# x* m! m; ~; E8 E

保证每个色谱峰下只有一个被测的组份
- C1 J6 T2 e/ x3 ?

. s A3 @# `" ]7 J/ p7 S

检查是否有共流出的物质（杂质）干扰
3 V+ b; h$ p6 _7 {, @
& Y: `$ f" p! r8 _( I' w

色谱峰一致性(纯度)确认的方法
" Z! c9 p. Q' M6 \$ e1 i

用光电二极管矩阵(PDA)检测器比较光谱图
7 r% v4 t* q& f2 ]& J

) t6 I9 F% d( o0 L

峰纯度鉴定
6 n6 a5 a1 N6 S$ b7 q: f

9 p- O$ B7 l% V( N( g& B7 I' W

2996的纯度角理论
) e" i) I0 y6 q7 }4 |2 [' q" a) a

常用的定量方法
标准曲线法,分为外标法和内标法:7 v5 t( B" W$ w) O) T" \6 r

外标法：在液相色谱中用得最多

内标法：准确，但是麻烦，在标准方法中用得最多

影响定量分析结果的因素

准确度不好可能由下述原因造成:

–峰面积积分不正确、样品分解或制样时导入杂质、样品瓶不密封,样品或溶剂挥发、制样不正确、进样问题、内标制备不正确

精密度不好可能的原因:

峰积分不正确、进样或进样器有问题、样品分解或制样时引入了杂质、色谱问题、检测器响应下降

文章来源：百度文库

作者: gongcl 时间: 2015-5-22 10:12 AM
谢谢分享

作者: 桂灵芝 时间: 2015-5-22 10:35 AM
谢谢分享！

作者: 黑龙 时间: 2015-5-22 12:12 PM
谢谢分享！

作者: ruichao2005 时间: 2015-5-24 05:20 PM
学习一下！！！！！

作者: 幻想家-13金 时间: 2015-5-25 11:25 AM
感谢分享！！！！！！

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