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标题: 【夯实基础】液相色谱定量分析原理 [打印本页]

作者: xiaoxiao 时间: 2015-5-22 06:55 AM
标题: 【夯实基础】液相色谱定量分析原理
本帖最后由 xiaoxiao 于 2015-5-22 06:57 AM 编辑
【夯实基础】液相色谱定量分析原理
2015-05-21 仪器信息网
液相色谱定量分析原理
在定性的基础上定量,需有纯物质作为标准物液相色谱定量是相对定量的方法:即由已知量的纯标样推算混合物中被测物的量定量的依据是:

被测组分的量与响应值(峰高或峰面积)成正比
Q$ w Q1 q9 V E6 s

由已知量的标样可求得定量校正因子

( M5 ^' N, o8 T2 ~$ ?

定量校正因子:是定量计算公式中的比例常数,其物理意义是单位响应值(峰面积)所代表的被测组分的量
- k% L! ^) o* Z% S; |9 }# ~

测定未知组分的响应值,通过定量校正因子即可求得其含量

/ {( _( X/ g+ v1 W/ h& ]. L8 V

液相色谱定量分析的步骤

1、选择一个适合定量分析的色谱方法：

确认被检测组分峰,并达到分离度(R)大于1.5
确定被测组分色谱峰的一致性(纯度)
# w- e- k/ A! J4 J
$ D4 `9 c! k8 B0 r1 ? M

确定方法的检测限及定量限;灵敏度及线性范围; v& k& G8 a* v6 G

, J5 O, `2 ^3 C4 K, `

2、用不同浓度的标准样品建立校正曲线
( o2 x6 {% {1 _5 f4 d9 w3、考查定量方法的准确度及精密度8 j" \/ O" h3 d6 s' A0 M
4、用相应的色谱管理软件实施样品采集,数据处理及报告结果
/ b$ Z" k3 V. F4 i- Q! z8 \鉴别需定量的色谱峰(定性)
定性鉴别每个要定量的色谱峰+ Y8 o* M. q9 O) P; ?7 _' x7 Q* _5 O
首先用标样确定欲定量之色谱峰的保留时间(Rt)，通过比较保留时间,找到未知样中各色谱峰所对应的组份，色谱定性是用与标样比较保留时间的方法，判据并不充分进一步的确认(定性)1、标准加入法
( w' q" B% j: j4 j2、同时用其它方法：其它色谱方法(改变机理,如:用不同的色谱柱) 、其它检测器（PDA：光谱图比较、谱库检索；MS：质谱图解析、谱库检索）3、其它仪器方法7 O3 P' V+ w' A6 W
确认定量峰的一致性
确认色谱峰的一致性(纯度)( E1 W9 x! _+ s8 f9 B4 B- d

保证每个色谱峰下只有一个被测的组份$ o, P7 l: [" O Y2 s

$ ^( d X0 P, Z* S

检查是否有共流出的物质（杂质）干扰
$ Y5 r1 F# I4 D9 S
* }3 u1 e7 w' A' }8 f$ N

色谱峰一致性(纯度)确认的方法! b* F9 {9 O R9 m: U" \ w

用光电二极管矩阵(PDA)检测器比较光谱图4 V3 [- Z$ ?% O- z2 |7 V- p# q

8 M) t0 q3 @4 g

峰纯度鉴定3 L( @1 H; G+ `5 ^

9 I3 s$ M4 G! W8 n( `% T8 I

2996的纯度角理论

4 y$ ~$ d$ Y: F" \

常用的定量方法
标准曲线法,分为外标法和内标法:
" P( k9 Q( t2 d( L2 s E' k

外标法：在液相色谱中用得最多

内标法：准确，但是麻烦，在标准方法中用得最多

影响定量分析结果的因素

准确度不好可能由下述原因造成:

–峰面积积分不正确、样品分解或制样时导入杂质、样品瓶不密封,样品或溶剂挥发、制样不正确、进样问题、内标制备不正确

精密度不好可能的原因:

峰积分不正确、进样或进样器有问题、样品分解或制样时引入了杂质、色谱问题、检测器响应下降

文章来源：百度文库

作者: gongcl 时间: 2015-5-22 10:12 AM
谢谢分享

作者: 桂灵芝 时间: 2015-5-22 10:35 AM
谢谢分享！

作者: 黑龙 时间: 2015-5-22 12:12 PM
谢谢分享！

作者: ruichao2005 时间: 2015-5-24 05:20 PM
学习一下！！！！！

作者: 幻想家-13金 时间: 2015-5-25 11:25 AM
感谢分享！！！！！！

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