【极限原创】月旭苯基柱测定恩他卡朋有关物质 - 药群论坛

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简介

　　珂丹 Company filmtab
　　通用名：恩他卡朋片
　　制造商：诺华

恩他卡朋的化学名称为：(E)-2-氰基-3-（3，4-二羟基-5-硝苯基）-N，N-二乙基-2-丙烯酰胺，分子式：C14H15N3O5，分子量：305.28。

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药理作用

　　本品属于儿茶酚-O-甲基转移酶（COMT）抑制剂，它是一种可逆的、特异性的、主要作用于外周的COMT抑制剂，与左旋多巴制剂同时使用。本品通过抑制COMT酶减少左旋多巴代谢为3-氧位-甲基多巴（3-OMD），这使左旋多巴的生物利用度增加，并增加了脑内可利用的左旋多巴总量，这种作用已在临床试验中得到证实。临床试验显示，左旋多巴加用本品可延长"开"的时间达16%，缩短"关"的时间达24%。本品主要抑制周围组织中的COMT。红细胞内的COMT抑制作用与本品的血浆浓度密切相关，而体现了COMT抑制作用的可逆性。

色谱柱信息：
ULTIMATE XB-PHENY1 4.6*100MM,3微米；sn：141301512

色谱条件：

参照进口标准和USP35-NF30;

进口标准：

测定法：HPLC法；

流动相：磷酸盐缓冲液（pH2.1）（加1.80g磷酸二氢钠和磷酸2ml，加水至1000ml）-甲醇-四氢呋喃（54:44:2）
流速：1.0 ml/min，柱温：35℃，检测波长：300nm。
色谱柱：苯基柱（100mm×4.6mm，3μm），进样量：20μl

供试品溶液：3mg/ml 精密称取适量（约相当于恩他卡朋0.15g），置50ml量瓶中，加四氢呋喃15ml超声溶解3分钟，加甲醇15ml，振摇5分钟，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，续滤液作为供试品溶液。
对照品溶液：3μg/ml的恩他卡朋与OR-454对照品混合溶液；定量限溶液：0.15μg/ml的恩他卡朋与OR-454对照品混合溶液。进样6次，RSD＜10.0%。

系统适用性溶液：3μg/ml的恩他卡朋与（z）-OR-611对照品混合溶液。

计算方法：外标法

OR-454和其他单一杂质的含量均不得过0.1%，杂质总量不得过0.5%（小于0.05%的杂质可忽略不计）应符合规定。整个测试过程应在7小时内完成。

usp：

测定法：HPLC法；

流动相：磷酸盐缓冲液（pH2.1）（加2.1g磷酸二氢钠加水至1000ml，用磷酸调节pH值至2.1）-甲醇-四氢呋喃（54:44:2），

流速：1.0ml/min，柱温：35℃，检测波长：300nm。
色谱柱：苯基柱（250mm×4.6mm，5μm），进样量：20μ，l溶剂：四氢呋喃-甲醇（3:7）

供试品溶液：3mg/ml 精密称取适量（约相当于恩他卡朋0.15g），置50ml量瓶中，加四氢呋喃15ml超声溶解3分钟，加甲醇15ml，振摇5分钟，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，续滤液作为供试品溶液。

对照品溶液：3μg/ml 进样6次，RSD＜10.0%

系统适用性溶液：3μg/ml的恩他卡朋与恩他卡朋杂质A混合溶液

计算方法：外标法。整个测试过程应在7小时内完成。

杂质名称    RRT    杂质限度(%)

杂质A          0.8       不得过0.2

单杂             -          不得过0.1

总杂             -          不得过0.2

综合后，参照进口标准。

色谱图如下：

1.系统适用性试验溶液：

备注：（z）-OR-611就是usp中的杂质A，中文名：（Z）- 2-氰基-3-（3,4-二羟基-5-硝基酚）-N，N-二乙基丙烯酰胺；因无法购进OR-454杂质对照品，故系统没有此杂质峰。另老外的标准喜欢用代码表示，为保密，故在仿制药研究要注意。

2.对照品溶液：

3.空白溶剂：

4.供试液：

5.供试液放大色谱图：

综上所述：月旭苯基色谱柱适用于分离恩他卡朋有关物质，且分离效果良好。