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标题: 氨基酸组分分析方法学验证 [打印本页]

作者: 1347371439yy 时间: 2017-11-20 05:18 PM
标题: 氨基酸组分分析方法学验证

教各位老师：

目前做一个多肽药物的氨基酸组分分析，用的是waters ACCQ 试剂包方法。有哪位老师做过这个项目的方法学验证，指导一下吧。是否还是以国家分析方法验证相关指导原则为基础？水解和衍生的回收率怎么设计？因为水解和衍生等前处理较复杂，有些项目的RSD是否可以考虑放宽，比如回收率？耐用性等还需要考察吗？因为这个是一个商业化的方法，是否可以省略某些验证项目？望各位老师赐教

作者: xiaoxiao 时间: 2017-11-20 09:29 PM
氨基酸的手性纯度是广大肽类药物生产企业最为关心的事情,一根高效的手性分析柱,合适的检测条件的选择,适当的流动相体系的选择都是必不可少的重要手段.
' s' V, ?4 \# K' S关于氨基酸手性分析方法的验证问题2 n$ B: {1 ?, e- t" c' ^
合适的检测条件指的是波长的选择问题,一般200-280nm都是可以选择的范围,但究竟哪种适合是有诸多讲究的. 首先,要保证被测主体样本可视,即有明显吸收峰. 其次,要能放大异构体的可观测度,由于样本中除了含有被观测主体外还存在其它杂质,为了避免其它干扰因素的影响,要尽量选择主体吸收高的波长,(做一个全波长扫描可以解决).
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2 e3 P# h. |# W5 e8 V! N- F9 V 适当的流动相体系是指流动相中A,B的选择还有梯度等因素.通过不断尝试首先要把两种不同异构体能分开,其次,要尽量规避小杂质在体系中与被观测的异构体重合,造成分析误差.这种条件的选择工作量虽然较大,但只要耐心总可以找到一个比较适合的方法.3 @) z! T; \$ Z2 c" o" q3 r
9 v. d$ c4 r: v- ` @0 L0 d" c0 T) ~
在解决了检测条件和流动相问题后,还不能直接用此对样本进行分析了,因为该方法尚未得到验证,其可靠性还存在疑问.验证的目的是要解决最低检测量和线性检测区间两个关键问题.

作者: 1347371439yy 时间: 2017-12-1 01:29 PM

xiaoxiao 发表于 2017-11-20 09:29 PM6 j; v6 P$ Z+ y- g: m5 R( e
氨基酸的手性纯度是广大肽类药物生产企业最为关心的事情,一根高效的手性分析柱,合适的检测条件的选择,适当 ...

感谢这位老师回复。我们目前的方法是合适的，各个氨基酸分离度很好，也能重现，毕竟是waters公司研发并且商业化的一个方法。主要是对方法的考察和验证有疑问，水解和衍生的回收率怎么设计等等，希望能得到解答。

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