药群论坛

 找回密码
 立即注册

只需一步,快速开始

查看: 1278|回复: 1

如何选择流动相pH?化合物pKa=4.5

[复制链接]
aiyao 发表于 2017-4-5 10:18:33 | 显示全部楼层 |阅读模式

马上注册,结交更多好友,享用更多功能,让你轻松玩转社区

您需要 登录 才可以下载或查看,没有帐号?立即注册  

x

为了保证样品外,也就是最好是大于5.5或低于3.5。
另外要注意以下3个方面:
1. 所选用流动相一定要能将峰检出——这个是基础条件,相信大家都知道。
2. 流动相如为缓冲液,它的pH值应在它本身PKa的上下1个pH值内,如超出此范围,缓冲作用将大大减弱。
3. 一般检测柱是C18,但使用C18柱时,流动相的pH值应在2~8之间,否则对柱子伤害较大。
根据以上要求,请选择适合自己实验的流动相。

c18反相柱对非极性的物质保留充分峰形对称,所以如果你的化合物是弱酸,记得好像流动相pH<pKa-2时,弱酸就会基本以游离态存在,呈非极性,达很好保留出很好峰形!所以你的流动形相就的选择2~2.5

当溶液PH值等于化合物的pKa时,化合物半解离。在pKa±1.5的范围内,保留随PH值的变化而变化,超过此PH值范围,化合物完全解离或不解离,保留随PH值的变化很小。
了解化合物的pKa值,可在pKa±1.5的范围内调节流动相的PH值,以改变其保留,达到成分分离的目的。或者,使流动相PH值超出这一范围,以保持保留的恒定,使建立的方法具有耐用性。
可参考《药物分析》化学工业出版社,盛龙生等 P235~237

谢谢楼上各位的热心解答,但你们讲的都不大一样,我该怎么确定呢?

根据分析化学,当弱酸(弱碱)溶液中溶液中离子浓度是分子浓度的100倍时,可以认为是完全电离的,化合物完全以离子形式存在;当弱酸(弱碱)溶液中溶液中分子浓度是离子浓度的100倍时,可以认为是完全不电离的,化合物以分子形态存在.
因此,为了防止HPLC中峰的拖尾,应当保证化合物全部以分子或离子形态存在,即溶液的pH 值应与pKa有2个单位的差别(pH≥pKa±2).如果化合物的pKa是4.5,溶液的pH值至少应该是2.5或6.5.
考虑到色谱柱的耐受性(pH=2~8; 甚至是2.8~4.5)\保留时间\样品的复杂性要求,理论上你可以选择低pH值的流动相(pH2.5),也可以选择高pH值的流动相(pH6.5).至于最终选哪一个,做个对比就ok了.



转自液色迷人的博客
回复

使用道具 举报

您需要登录后才可以回帖 登录 | 立即注册  

本版积分规则

QQ|手机版|药群论坛 ( 蜀ICP备15007902号 )

GMT+8, 2024-3-29 09:21 PM , Processed in 0.094937 second(s), 22 queries .

本论坛拒绝任何人以任何形式在本论坛发表与中华人民共和国法律相抵触的言论! X3.2

© 2011-2014 免责声明:药群网所有内容仅代表发表者个人观点,不代表本论坛立场。

快速回复 返回顶部 返回列表