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示差检测器是高效液相色谱仪上的一种检测器,配合液相色谱仪对样品进行分析检测。6 h8 P$ g* d3 K; V1 V* c7 t# x
示差折光检测器是基于样品组分的折射率与流动相折射率有差异,当组分洗脱出来时会引起流动相折射率发生变化,这种变化与样品组分的浓度成正比,从而进行检测。
1 [( ]% M E7 I3 R一、示差折光检测器类型:
% L. z. l0 m3 I$ t" V: Y( f( q8 y1、反射型:根据Fresnel定律。
- a) Z; `0 d1 ^0 r2、折射型:根据Snell定律。
/ u6 Q# I- f ?' A/ H$ ~- |3、干涉型。4 O8 V3 S9 x' f: m/ \
二、示差折光检测器特点:
4 p' o- L3 _2 O. _1、绝大多数物质的折射率与流动相都有差异,属于通用型检测器。
0 ^7 U. x5 g& S5 B. i) A& K2、灵敏度低,对温度敏感,不能用于梯度洗脱。" j7 R' X3 `1 v4 s$ C* Z
三、示差折光检测器应用:7 `9 ]/ D" Q) Z* V, b% a
1、比较适合检测无紫外吸收的有机物,如高分子化合物、糖类和脂肪烷烃等。& a! t' p1 S; p: b8 h
2、在凝胶色谱仪中是必备的检测器。
$ e: n* M6 T0 i3 V9 y3、在制备色谱仪中经常使用。% v8 N& y* M' `" r; w
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v* ^- L" Z8 q- ~优点:对糖类检测灵敏度较高,其检测限可达10-8g/ml;稳定性好,操作方便。
3 S1 `8 U# E. c, z5 P缺点:该检测器对多数物质的灵敏度低(约10-5g/ml),通常不用于痕量分析;受环境温度、流动相组成等波动的影响较大,不适合梯度洗脱: a; s( u5 p( x. {/ {
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9 L# ]- B9 C5 _. \应用' C1 v$ A/ i3 \2 i5 z+ N$ J9 ]
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示差折光检测器主要受温度、流速以及流动相的种类等因素的影响,示差折光检测器是较难稳定,但是和仪器本身的硬件条件有问题,如能设法控制以下几个因素,情况会大有改善: (1)流动相一定要混匀,而且要充分脱气,最好用单元泵。 (2)有条件的话将溶剂瓶、柱温箱、检测器的光学单元温度控制在同一个温度,且最好高于室温5~10℃。不要将检测器放置在通风橱或是空调出风口处。 (3)环境温度不要变化太大,实验室最好门窗关闭,如果没有柱温箱那就把检测器温度调低一点。 (4)要把废液瓶和溶剂瓶放在示差检测器与泵以上位置,这样可以使样品池略有压力,有助于优化检测器性能。 此外,在安装示差检测器时,由于其流通池的反压估计为5bar,所以示差检测器在流路系统里必 须放在最后。如果还要在系统里增加一个检测器,必须放在示差检测器的前面,以防压力增大时损坏 示差检测器的流通池。同时建议在运输或搬迁示差检测器到其他场所时,流通池里最好装有异丙醇, 这是为避免在周围环境温度降低时使流通池破裂。
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