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示差检测器是高效液相色谱仪上的一种检测器,配合液相色谱仪对样品进行分析检测。" M" b; l$ m; p# f9 @* Z
示差折光检测器是基于样品组分的折射率与流动相折射率有差异,当组分洗脱出来时会引起流动相折射率发生变化,这种变化与样品组分的浓度成正比,从而进行检测。6 G9 f O a- Y3 E c
一、示差折光检测器类型:! _, `5 t4 W! a5 P1 _" H% Z) Z1 {
1、反射型:根据Fresnel定律。" R* N, X0 k# G. C6 k3 i
2、折射型:根据Snell定律。/ ~" w- t4 V7 V) D
3、干涉型。
$ f* g' h- Q* b二、示差折光检测器特点:
+ s2 f( Q$ t% l& k1、绝大多数物质的折射率与流动相都有差异,属于通用型检测器。% l0 a! _9 z4 h
2、灵敏度低,对温度敏感,不能用于梯度洗脱。
R D2 a7 W9 E* k三、示差折光检测器应用:
6 @, N1 w- H. |9 u' `. Y8 u1、比较适合检测无紫外吸收的有机物,如高分子化合物、糖类和脂肪烷烃等。% q8 k0 V( e6 i9 h' B
2、在凝胶色谱仪中是必备的检测器。' V) ~2 x5 \8 B8 m: U/ k
3、在制备色谱仪中经常使用。4 J9 M6 ?7 U' M% s, j
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优点:对糖类检测灵敏度较高,其检测限可达10-8g/ml;稳定性好,操作方便。 C5 C; W4 c- B& F$ [8 }" o& @7 D* E
缺点:该检测器对多数物质的灵敏度低(约10-5g/ml),通常不用于痕量分析;受环境温度、流动相组成等波动的影响较大,不适合梯度洗脱3 v$ [* ?4 P4 a- n, g* S
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1 f6 T9 G. J& A5 u# r0 G示差折光检测器主要受温度、流速以及流动相的种类等因素的影响,示差折光检测器是较难稳定,但是和仪器本身的硬件条件有问题,如能设法控制以下几个因素,情况会大有改善: (1)流动相一定要混匀,而且要充分脱气,最好用单元泵。 (2)有条件的话将溶剂瓶、柱温箱、检测器的光学单元温度控制在同一个温度,且最好高于室温5~10℃。不要将检测器放置在通风橱或是空调出风口处。 (3)环境温度不要变化太大,实验室最好门窗关闭,如果没有柱温箱那就把检测器温度调低一点。 (4)要把废液瓶和溶剂瓶放在示差检测器与泵以上位置,这样可以使样品池略有压力,有助于优化检测器性能。 此外,在安装示差检测器时,由于其流通池的反压估计为5bar,所以示差检测器在流路系统里必 须放在最后。如果还要在系统里增加一个检测器,必须放在示差检测器的前面,以防压力增大时损坏 示差检测器的流通池。同时建议在运输或搬迁示差检测器到其他场所时,流通池里最好装有异丙醇, 这是为避免在周围环境温度降低时使流通池破裂。 ! R2 @2 Q5 q3 J3 M' _6 D% A
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