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示差检测器是高效液相色谱仪上的一种检测器,配合液相色谱仪对样品进行分析检测。
4 t1 _' d1 N/ r2 N示差折光检测器是基于样品组分的折射率与流动相折射率有差异,当组分洗脱出来时会引起流动相折射率发生变化,这种变化与样品组分的浓度成正比,从而进行检测。* G$ | ~( s. {* N! K: H
一、示差折光检测器类型:( R/ \# @2 j# w( b
1、反射型:根据Fresnel定律。7 z! E) e& E0 d% d
2、折射型:根据Snell定律。. o7 e. y7 }; |2 w6 E
3、干涉型。
) x* k: C& R6 V) T9 j! S. s二、示差折光检测器特点:
2 v, z, [+ T6 r- i8 ]) l1、绝大多数物质的折射率与流动相都有差异,属于通用型检测器。0 P( s1 K, \: t6 x6 G3 n6 S
2、灵敏度低,对温度敏感,不能用于梯度洗脱。- }9 ]; V" c5 C+ c8 T7 {
三、示差折光检测器应用:
B* j9 N* \3 U; B0 Q* N. p1、比较适合检测无紫外吸收的有机物,如高分子化合物、糖类和脂肪烷烃等。/ J8 g% f1 K* k1 |
2、在凝胶色谱仪中是必备的检测器。1 e1 [( @ z, y% e- Z5 X: {; {$ A1 g
3、在制备色谱仪中经常使用。* U+ u! T# q+ f; b: ^: r+ X
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优点:对糖类检测灵敏度较高,其检测限可达10-8g/ml;稳定性好,操作方便。5 R+ Y( X5 [, _
缺点:该检测器对多数物质的灵敏度低(约10-5g/ml),通常不用于痕量分析;受环境温度、流动相组成等波动的影响较大,不适合梯度洗脱
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应用
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# z( I! ^# t; W4 L3 A示差折光检测器主要受温度、流速以及流动相的种类等因素的影响,示差折光检测器是较难稳定,但是和仪器本身的硬件条件有问题,如能设法控制以下几个因素,情况会大有改善: (1)流动相一定要混匀,而且要充分脱气,最好用单元泵。 (2)有条件的话将溶剂瓶、柱温箱、检测器的光学单元温度控制在同一个温度,且最好高于室温5~10℃。不要将检测器放置在通风橱或是空调出风口处。 (3)环境温度不要变化太大,实验室最好门窗关闭,如果没有柱温箱那就把检测器温度调低一点。 (4)要把废液瓶和溶剂瓶放在示差检测器与泵以上位置,这样可以使样品池略有压力,有助于优化检测器性能。 此外,在安装示差检测器时,由于其流通池的反压估计为5bar,所以示差检测器在流路系统里必 须放在最后。如果还要在系统里增加一个检测器,必须放在示差检测器的前面,以防压力增大时损坏 示差检测器的流通池。同时建议在运输或搬迁示差检测器到其他场所时,流通池里最好装有异丙醇, 这是为避免在周围环境温度降低时使流通池破裂。
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