【夯实基础】液相色谱定量分析原理

& z* `+ B+ T+ {: b【夯实基础】液相色谱定量分析原理
2015-05-21 仪器信息网
液相色谱定量分析原理
在定性的基础上定量,需有纯物质作为标准物液相色谱定量是相对定量的方法:即由已知量的纯标样推算混合物中被测物的量定量的依据是:

• 被测组分的量与响应值(峰高或峰面积)成正比
  
  * v2 j+ N. T. U! q& e5 y& X

• 由已知量的标样可求得定量校正因子
  
  # ~3 @! e. p8 g% \4 u

• 定量校正因子:是定量计算公式中的比例常数,其物理意义是单位响应值(峰面积)所代表的被测组分的量
  
  

• 测定未知组分的响应值,通过定量校正因子即可求得其含量
  
  * g$ s- l1 A1 V. G6 Q- l# O

液相色谱定量分析的步骤

1、选择一个适合定量分析的色谱方法：

• 确认被检测组分峰,并达到分离度(R)大于1.5
• 确定被测组分色谱峰的一致性(纯度)
  
  
  6 C+ H) g+ W' ~( w! ?/ b2 Y

• 确定方法的检测限及定量限;灵敏度及线性范围
  
  
  

2、用不同浓度的标准样品建立校正曲线
3、考查定量方法的准确度及精密度
4 c! t& |& B$ }, L4、用相应的色谱管理软件实施样品采集,数据处理及报告结果
2 S# z8 ]& H- {$ f: x鉴别需定量的色谱峰(定性)
定性鉴别每个要定量的色谱峰
. |/ }# q4 C7 k4 B7 A首先用标样确定欲定量之色谱峰的保留时间(Rt)，通过比较保留时间,找到未知样中各色谱峰所对应的组份，色谱定性是用与标样比较保留时间的方法，判据并不充分进一步的确认(定性)1、标准加入法
! @0 W* ^3 T  O% ]- Y2、同时用其它方法：其它色谱方法(改变机理,如:用不同的色谱柱) 、其它检测器 （PDA：光谱图比较、谱库检索；MS：质谱图解析、谱库检索）3、其它仪器方法
, x, A( x2 q1 m+ ]9 ~  V( ]: e确认定量峰的一致性
$ E6 a9 `( @( h. J4 R确认色谱峰的一致性(纯度)

# t8 ?; d" t! v1 c) ]3 p9 X

• 保证每个色谱峰下只有一个被测的组份
  - m4 z; [) |+ w, h4 ?: F
  
  

• 检查是否有共流出的物质（杂质）干扰
  
  
  

色谱峰一致性(纯度)确认的方法
( D* B+ H( B6 n# Q

• 用光电二极管矩阵(PDA)检测器比较光谱图
  1 r4 _  z7 q) Y/ e
  
  0 y+ v" Q7 _7 r

• 峰纯度鉴定
  . H6 ^9 l# E3 a
  
  

• 2996的纯度角理论
  
  

常用的定量方法
标准曲线法,分为外标法和内标法:
7 i+ G8 `- I, R7 @6 h5 q

外标法：在液相色谱中用得最多

内标法：准确，但是麻烦，在标准方法中用得最多

影响定量分析结果的因素

准确度不好可能由下述原因造成:

–峰面积积分不正确、样品分解或制样时导入杂质、样品瓶不密封,样品或溶剂挥发、制样不正确、进样问题、内标制备不正确

精密度不好可能的原因:

峰积分不正确、进样或进样器有问题、样品分解或制样时引入了杂质、色谱问题、检测器响应下降

文章来源：百度文库

/ {( f( i  P  B. B7 R

谢谢分享                 

谢谢分享！

谢谢分享！

谢谢分享！

学习一下！！！！！

感谢分享！！！！！！