清洁验证之溶剂残留问题

原料药的多品种车间，某难溶性产品做清洁验证，设备使用的清洁剂是二类溶剂二氯甲烷，那么问题来了。再用二氯甲烷取化学残留样品完成后，我们设备上残留的二氯甲烷是否需要考虑？限度如何定？取样方式是擦拭？或淋洗？擦拭的话，用什么溶剂去擦拭？；淋洗的话用什么溶剂去淋洗？（二氯甲烷与水及其他的三类溶剂均不相溶）
% B  S5 g/ ^7 C) J

这个问题不错，知道的积极参与，飞飞发点供大家学习，不好的请谅解，亲们发表自己的意见
; ?- x4 j9 j: y) ^/ w: |* M

设备清洗和清洁验证
3 l- s& O& q. |2 H1 m6 e
FDA（CGMP）：
1 s7 F. b. Q  k: A6 f' H
􀀩 211.67 设备清洁和维护间隔一定时间应该对设备和用具清洗、维护和消毒，防止可能的故障和污染。改变药品安全性、均一性、效价、质量或纯度。

                               
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+ B" X  `6 {- F% r6 x
欧盟GMP:药群论坛
3 `5 t) u- Y- ]2 Z
􀀩336 生产设备的设计必须容易进行彻底清洁，必须按照详细的书面操作规程进行清洁，并储存在清洁干燥的条件下。
$ ~/ ~8 w! d+ \' ^+ B/ K
0 R& t2 S; Z' Y0 r* d- i􀀩 337 洗涤和清洁设备必须正确选择，保证在使用时不会带来污染。
" W- W( o' \0 c+ ?
1 _$ ~3 Q  K% pTGA：

􀀩 3.36 生产设备选型必须考虑到能彻底清洁。设备必须根据详细的书面程序清洁并存放在

0 Q$ B% h/ o& ^% ~1 Z洁净干燥的环境里。

􀀩 3.37 设备的洗涤剂和清洁剂不能产生污染。

5 G7 E1 Q5 i1 W3 E4 T- H2 d                               
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+ _* ]. a4 O) c; T

0 P% r2 Z/ J3 l$ U& @" Y设备清洗：药群论坛

定义：从设备表面去除可见及不可见物质的过程。

生产设备表面（接触物料）

􀀩 内表面
1 o$ R! a9 i2 L+ |  u! Z* \3 z
- a. z: o( w* y# V5 W# y% I) u# W􀀩 外表面
+ F/ J; @9 A4 R1 Z
清洗过程去除的物质：

􀀩 活性成份
1 i* I+ c0 {& u6 b3 \6 B) t; r+ o
􀀩 活性物质的衍生物
+ X& s8 T" \! \: w( S
􀀩 辅料（赋型剂）

􀀩 清洁剂（来自清洁过程）
# J0 D' ]1 F4 X. u
2 I$ V' K4 X8 A. d6 Q* X􀀩 微生物（来自物料污染、清洁污染）

$ o; i% ~7 \) ?0 d, H􀀩 延长设备的使用寿命消毒剂
$ a0 |  f# Z) \5 a
􀀩 润滑剂

􀀩 环境污染物质

􀀩 设备运行过程中施放出的异物
. \! I* c8 H( g2 p
2 z2 `: H% f/ T4 R. L3 X) u􀀩 冲洗水中残留的异物

                               
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- T7 a. C4 x" y( o( _设备清洗的四个步骤：药群论坛

% W4 u/ k* k4 |( C􀀩 清洁

1 C( G( n* Q9 y8 F1 d􀀩 消毒

􀀩 干燥
# H% ^. z% B( u( I
" H; `/ G* e; c1 K􀀩 贮存
, ]: J, D1 Q& f* d7 j1 z. p
3 G& {. O) U8 a. @/ N) d7 r设备清洗需要说明（1）：

􀀩 产品配方与生产工艺必须经过评估，确定需清洁的残留物。

􀀩 生产过程中所有设备都需被评估并标示出每个设备需清洗的残留物。

􀀩 当多种产品的生产使用同一设备时，应确定最难去除的组分。
% b4 w1 s) o0 |) F8 l( P2 X
􀀩 说明设备组成的材质，特别是与产品接触的部分。
, x8 A+ K4 Z" @
􀀩 说明设备的结构，列出取样点及取样方法，可用图示表示。

4 W0 r7 |- C9 V* h: {  {设备清洗需要说明（2）：药群论坛
5 c4 c  Z) E  `# f$ u2 m- a
􀀩 说明清洁工艺参数，例如清洁时间，温度，压力和清洁剂浓度等。

" L& r3 A. i3 {) j6 E* N􀀩 设备清洁时的拆卸或重新装配程序。

5 V) E* d2 F0 H1 t! Z􀀩 说明清洁方式，例如：在线清洗CIP，外用设备清洗COP，使用的溶剂或洗涤剂，清洁过程等。
& s( y) x7 u5 m# W7 N6 @
􀀩 清洁程序应说明清洁有效期，可通过清洁验证中微生物检测来确定。
% I9 u+ Z3 G- M/ u$ F
: ]7 A  V7 K* {- `/ R  R" c􀀩 生产完成到清洗开始之间可等待的时间应确定，可在清洁验证过程中确定，并应在三批清洁验证中重复进行。

( o% [8 T" |; e. q! `4 G. E1 U良好的清洗结果的重要性：

􀀩 降低交叉污染的风险

- j) p+ D( n  B8 W7 {3 U􀀩 使得产品受污染报废的可能性最小
4 `2 v5 Y3 c/ j6 O$ X  V
$ g1 [" o3 z- p( a+ K3 E􀀩 患者的负面效应可能性最小

( x3 e* l! ^0 F8 Q􀀩 降低产品投诉的发生率
3 ~. v5 I+ E7 h) G) o
' J; g1 E+ p+ i% ]􀀩 降低卫生部门或其他机构检查不合格的风险
2 \, |# B! G# _/ y  Y
􀀩 延长设备的使用寿命
6 o% ?9 o& Z# k9 }

                               
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! C5 l* s7 F, _% L& C& x+ y
清洁验证：药群论坛

; e9 i; X6 \9 h6 S清洁验证Cleaning Validation：

9 ?/ ~) P- ^3 z- M" B! `可证明用于直接与产品接触的设备表面的清洁的程序具有再现性与有效性的书面证据。

9 C: E" d( X. \3 J8 ~! {0 Z清洁验证的基本要求：
# F. w# L% b5 X- H) V; G
评估工艺过程确定应去除残留的类型
& V2 \' ^3 a8 f4 S
选择合适的清洁剂

( T0 Z! ]4 J7 Y& h- Z检查生产设备组成确定清洁方法，取样方法和取样点
- `! [6 h5 b; @
检测方法必须适合适用并经验证
$ R9 b! ^& X) i( Y
9 B  g. v( U, t6 Y- }1 E5 {/ o必须建立书面接受标准

! _, k5 R. Y6 c建立书面证据表明设备已被清洁并符合接受标准

! O7 w& J- w  @验证或检查中的不符合必须进行调查并通过CAPA程序提出报告
) t9 b9 \2 {3 N1 N# i2 y0 f

+ j7 Q, t5 c, q* l$ [4 R                               
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/ ~# R# y9 M8 z# [8 U' r$ iFDA清洗验证检查标准：药群论坛
- ^. j. H/ ^" S- l1 F
' T* }# P( _6 c  B7 M􀀩 检查其科学数据能否证明系统稳定一致地达到预期目的，系统结果稳定地符合预先制定的标准。

FDA清洗验证的要求通则：
" M. r6 I8 `* `( k# d; _
􀀩 建立书面标准操作程序（SOP）
+ \* ^7 |7 W  p# O
( ^5 i2 t1 w8 T2 a, S- ~0 u4 f􀀩 必须建立书面的清洗方法验证通则

5 W; z+ ^0 R1 {1 k8 L􀀩 清洗方法验证通则要规定执行验证的负责人、批准验证工作的负责人、验证标准（合格标准）、再验证时间
  `+ \  \: t  H& X
􀀩 制订专一特定的书面验证计划
4 G8 T3 X" S$ {/ u6 W9 _' F0 t: Q
􀀩 记录严正结果

􀀩 最终的验证报告

" L; y3 K4 r; E" R* V开始清洁验证：药群论坛
) ]; \  A* I) G! F
- ]0 H9 b; U( [  e* 最难清洁的物质和参照物质
' ~8 t  `# ~5 E' ]3 }3 G8 r8 V* Q
* 最难清洁的部位和取样点
% D, Y* _* d" x8 c) z
5 I+ u2 ?1 P! u3 R# v& n: I# k* 目检不得有可见残留物

* 残留物限度的确定

* 微生物限度标准

- n: ^- i$ x$ [1 T* 取样和测试方法

* 验证方案

( S- g. x& Y0 G8 x8 ]3 v设备清洁的类型        药群论坛

/ i! ?. U- u4 ^" A1 A6 K􀀩 手工清洗
, F7 j' i4 P. U/ K9 d# X
由操作人员用檫洗或用高压软管进行的清洗
+ s& R4 P" o/ j6 H
" T$ N: c( h& Y+ v; A3 `􀀩 自动清洗
) S# M8 X) |& m3 a$ T1 U, x
! Q/ v5 P' S+ M; ]由自动控制进行洗刷直至干燥的清洗
; v8 f; Q- `5 x( [
! j/ R4 w# D+ [9 ]􀀩 半自动清洗
% b3 Y8 V# X" m% R( @7 I# A4 ~  _+ x
1 c) J: `; z  O0 _3 p/ ?( Y' k1 I: r结合以上两者的清洗过程
( t! x9 [7 Y; |
7 d- N/ j: A- _1 `清洁验证的策略
! A2 i4 j: m# k
􀀩 决定的条件

* 产品分组

* 设备分组
% O+ y( I4 M& i0 b% p' ^
* N/ @; U8 ^$ e9 P/ ?" S0 N; g* 限度计算选择

* 分析方法

, ~' v: h' N4 W1 ~! v8 f6 `* 取样位置选择

5 n5 o7 H+ o( s# ~" J0 J: x清洁验证的策略
2 b, u4 w4 S5 `' l6 h# X! I8 w
/ R( V4 h4 q" H0 k8 u. j+ `5 l' Y􀀩 质量、制造部门和技术部门必须科学地审定

􀀩 确定在验证过程中需要的文件支持
; f2 [* ^6 H  |4 ^3 c, b3 C0 p

6 ?) Z' i- z# q6 E1 W! H最难清洁的物质和参照物质：药群论坛

9 U) Z; E9 U* `& c. y# g( D# q8 x* 活性成份复方制剂（多种活性成份）残留的“参照物”：多种活性成份中最难清洁（溶解）的物质。
& k, k4 @7 k  c8 w  N1 t
1 x9 w! Y7 [, y* 辅料（赋型剂）
2 j2 X$ f8 b' W! O' }& Q1 Q
1 M8 n4 I, n! m5 L0 z8 X, ]最难清洁的部位和取样点：
# a( v- D9 m( k; M) M& |. \
  m% S; L& Q- K$ v8 i4 N2 b  c* 设备内部死角

* 清洁剂不易的接触部位
/ Z  s- s: G, C7 {. y3 `
- j& i$ X- W+ c0 F+ [* 压力、流速迅速变化处

, d2 k& B+ R1 [7 f0 ?( p/ r8 N* 管径变化处
+ `" n: l! s$ Z% i' m0 t
各类工艺管路（PA、N2 、真空等）

7 f! R8 K7 c6 R' e0 y7 L. Z% J清洁验证的取样点的确定：

􀀩 取样点的确定依据：
2 k# ^) S1 k7 ~% q+ e+ a
* 设备最难清洗部位
' ~  t9 ~" R4 ~# r, j! z
- \1 S8 A5 v# y& U' @- J* g* 关键部位
. m! C/ u5 K+ e" A$ G
, y5 x7 d8 T, E  d* 最有代表性部位

# H+ N6 ?% u! @; q5 f5 V* z* 结构材料的不同部位

# ]7 k8 p7 @7 C" H4 c+ G- L) s! ]* 取样点的方便性和重现性

: ^; Q& M! C# e# Q- h, a* 设备的总尺寸
3 g. y/ L/ y$ b  x# k+ s" n
  b! p) Q, q  R8 j/ i! m0 K2 U􀀩 绘制取样点位置示意图

设备清洗/清洁验证的三个层面：

1、目检（肉眼检测）

2、化学检验

3、微生物检验
3 x& p2 s! l5 ]* _* b9 B' E% p8 V' r
5 l; E# @( j- f. A1、肉眼检测限度：

, }% x/ A& q( A  `+ F) v* t" _7 ]4 I* 目检不得有可见残留物
4 Q6 c8 ]5 M  U7 G9 s* F! q
* 是直观、定性、简单评估清洁的方式

& U! D0 C% ]& f7 P. a) L, Q0 h7 J: [, M8 |* 经验数据：目见能发现最低的残留物

限度是1μg/ cm2
, r6 i$ v4 }/ C: R) }
2、化学检验—残留物限度的确定
5 ]! D+ y. B! Z& \# h
  B% V. D, O6 n' {4 Y1、残留物浓度限度：10 X 10-6 (百万分之十)
* E$ o/ |  d3 G9 O5 h0 P
2、生物活性度：正常治疗剂量的1/1000

3、残留溶剂限度标准

5 X; v% ^8 g# D# j5

. Q/ w% ]8 e* B（1）残留物浓度限度

* 10 X 10-6 / 百万分之十/ 10ppm

, m" u1 U. }: X% Q/ f) ?# J" M* 含义：上批产品残留在设备里的物质全

部溶解到下批产品中的浓度限度

≤10 X 10-6

* 检测：最终冲洗水中残留物的浓度限度          药群论坛
) C8 I9 {5 b3 G2 ^8 g
: P& N3 G& Q$ p7 }4 L≤10 X 10-6
$ \; E0 l  U/ ?6 M: Y7 y( i
（2）生物活性度：
5 g' d2 f0 _' l' ]
% E4 n# i& o6 N. [! O* 正常治疗剂量的1/1000

* 含义：最低日治疗剂量（MTDD）的1/1000
9 F* S% \' S: M/ F, N1 m& D! w- p" e
* 检测：

/ @4 B! s1 x0 J! |5 A$ ^: C# tTMDD =每次给药数X活性成分含量X每日最少给药次数

$ g. {2 j" c8 `- n允许残留物总量（μg/ cm2 ） =MTDD X 最小生产批量X 1000单个制剂质量X每日最多使用制剂数X设备内表面积
3 Z% ~+ p7 [5 o+ t; v+ i! N# K. u
+ c) [2 d. S, o9 U（3）残留溶剂限度标准：
& [/ H5 |" W4 m. [- n, p* k
3 H, e4 I6 U" a# I1 M# m􀀩 可用于清洗的化学溶剂(三级溶剂)在下批生产中允许的溶剂残留小于初始溶剂浓度的0.5%。
# q- a; C* O. n" G
, {( L! }$ `4 q3 B微生物检验—微生物的限度标准
6 l5 E$ _3 o' U
􀀩 清洁设备的微生物限度标准应该等同于所生产的产品的微生物限度标准
, \4 a( @$ \  Q( n9 y
" l& T+ u- M1 K# P& O3 k: B& ~􀀩 清洗周期验证

清洁验证取样方法：
+ ?! N7 o! U: v) _% E4 O; [+ s: s/ r
. i2 \! ]& d% W5 q- f' \2 f7 T1、擦拭取样（表面直接取样法）

; h5 O  `  D. X" I" o- 棉签取样
9 l- s' W( r/ z/ ?/ V: Q' j8 j
6 U, f( a0 `& }% C1 B* y  p0 K, B" p5 R-Rodac Plate取样
& v: u$ e3 S$ T6 [& T" r
2、最终冲洗水取样（漂洗液样品）
2 J4 ]9 o+ l% q' S* w" k$ q
棉签取样
: _8 l: t4 Z8 V0 {7 i$ |
劣势

# ?1 A# i% r( Z, G- R, H􀀩 依赖取样技术
* A/ Q4 W9 B1 u, O+ C! ~8 `* ^6 B1 d  N
􀀩 棉签和棉签的种类对回收率和特异性试验有影

响
5 ]! y1 M. z6 X* ^
' e- }: Y% x, Y& w( E" @􀀩 可以有预先浸润的棉签

􀀩 不允许有较硬的棉签划
7 Z: ~* ]# d4 |3 ]5 M' X
! n% u+ {' ^2 ?; ~  V0 C" E% M伤取样表面
# N! C6 Z# V* J  F' `6 k) z6 `
􀀩 必须要确定回收率
  g  M0 L8 H: z8 Z9 K; Y
􀀩 取样区域不准
8 r* \6 K; a$ H
0 D' ^9 {9 _" m+ c1 U8 t􀀩 棉纤维会脱落
2 j; I1 e' x6 X$ s7 F- \
1 W; ]+ I9 k5 j0 u9 e优势

􀀩 属于物理取样

􀀩 适用于多种表面取样
  r- L5 D8 C' H4 z+ O" v0 b* f, f
􀀩 价格经济
5 r& h8 ?+ F6 c6 K5 y
􀀩 可以在任何的表面取样

􀀩 允许取样多种药物残渣
+ B3 w: ]) C. w
& K0 w4 S# B9 u?? 可以在干燥或潮湿的表面取样          药群论坛
2 _! m- F* v/ Z1 Z6 r
􀀩 溶剂可以很好帮助残渣
, o3 Q* x9 M' u5 j/ j
分散在稀释液里

8 G0 o9 b9 Q9 |4 E# A
, k' }) x, S0 u, V  ~' K8 ]接触平板（Rodac Plate）

8 u% ^' S; V. \% e􀀩 Rodac Plate
* ?. U1 u" X3 E1 b
Replicate Organism Detection and Counting

, [# p" a% V7 X- w* {1 K# H接触取样平板
; i6 ~0 C, O9 y1 E) o$ Z# o
6 m9 Y" [8 B! Q, A接触平板（Rodac Plate）
) o! E1 [( L9 _) g% P
' P) [' Z6 y, c& l􀀩 预罐装接触平板（Rodac Plate）

- 尺寸：15 X 65 mm
- x" C5 B9 B( ?! d4 J" m: C
+ j+ o+ }8 a% T- 单位面积：25cm2
6 U$ z/ S0 E) c  L
$ C& h, f, `) f  Z- j- @0 ^; x􀀩 用途：表面取样
, ~# l, o) C8 @5 H' V& V
􀀩 无菌包装

1 J, o' {' D  s: I接触平板（Rodac Plate） 接触平板（Rodac Plate）
9 E& a- e4 u, ^  |& U' q, K9 R; D3 E
冲洗水取样
" O0 }( r3 ~/ D$ }4 {* K
: s, t. x& |2 X, R% ]7 u优势
) p, `' _: N  @6 X
• 适应在线检测

2 f: P' K1 @6 L- e• 出结果快速
, {) E: }- W: |" ]% O
3 k% P: F  q- }, e4 p$ ]3 J) N; F• 取样简单

  p0 k8 Q4 G. ^. R9 d• 适用于大面积和难以达到的位置取样
2 R+ C; G4 t5 m& F8 j
# W$ {9 e5 B$ v( |5 r• 仅表面取样

• 多种药物残渣可以溶出

• 可以加大溶剂/冲洗水的

量,增加药物残渣的溶出

劣势
8 P$ o; P( m( s% A
• 不能直接在表面取样
7 j+ [: n4 L5 \$ }  I
0 v- K* S4 K7 r- P0 M( C; ^) U• 残渣的溶解性取决与溶剂的性能
& j4 _* W+ V0 s; |% n# P$ v
• 检验量大

& W, S- V' V& ^2 ?8 J• 冲洗溶剂的用量可能较大

• 冲洗水样可能要求浓缩或预先浸出
" d) l+ y- u/ Y9 q6 y1 a
• 不能够保证相同性质的溶出物

7 X; m; [* T& l; j. @- E* T
; E6 b8 a& c, v# V6 C/ B. \* J

                               
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微生物限度标准（１）       药群论坛   
# y6 C) b  Z5 i3 G
􀀩 可接受标准：微生物限度决定于产品生产环境，相应产品的微生物限度，以及致病菌检验要求。

4 g+ U; {: e. k  y. J+ C# H棉签/ Rodac Plate取样：

5 Z1 d  T7 y. K: {口服制剂：≤ 10cfu/25cm2


( i' t6 ~+ r, H8 _7 \- z1 x4 r
# r% w4 O+ l3 j
微生物限度标准（２）

. Q  y" r# t/ U6 o: i, z& ?􀀩 在清洁结束后，干燥前，取最终清洗水。

) |( i$ }2 w* {6 G4 H, _/ q* J& h最终清洗水限度： ≤ 1cfu/mL
, p% P) `- G% Z& Q8 N1 S6 S
清洁验证取样：

􀀩 化学取样
0 A  ]  [( D1 N: C+ L+ K; A, C
* 棉签取样
; U+ c0 A8 W5 _& W* U; c" d
– 冲洗溶剂取样
. M6 `& I4 d& |
– 最终冲洗水取样

$ s7 \# t) b, @" t! l3 P+ p􀀩 微生物取样
6 r9 ?) I+ a! C* W: L
* 棉签取样

" s1 D! e( N' `7 B* 最终冲洗水取样
2 N4 T* V; r8 |4 g: F( |1 ^
. n4 i* H. p% m3 z; t清洁验证检验方法
: O" m" w: ]: q; b. g/ [
2 A4 [& v2 j7 V: P" |' W6 U􀀩 检验方法对于分析物是特定的

􀀩 检验方法必须经过验证以证明：
& J4 |4 @! J- ?' A0 z
* 合适的取样方法
" u' h7 G2 B7 m  e
* 有效的检验方法

* X' `1 M4 L  W. n. x: Y6 E清洁验证检验方法：薄膜过滤法Millipore公司微生物试验过滤装置   

- 一般过滤系统员/ Microfil 过滤系统

- 0.45μm 滤膜

清洗剂的选择：

􀀩 根据将要去除的残留物选择清洗剂          药群论坛
9 O4 a7 }9 M* K6 j
􀀩 与材料相容的

􀀩 安全，无危害性的

􀀩 经济实惠的
0 W. g  u, E1 Z/ ~: X0 c* d( n
􀀩 对环境无冲击的

􀀩 无毒的

􀀩 对去除微生物有效的

􀀩 本身非常容易去除
! Y! F- Z6 M" q1 E7 Q
􀀩 低发泡的

$ ?: b- u( I2 h, @􀀩 应该是控制的配方
) V4 V" a8 ^/ l5 A
何时要做清洁验证

􀀩 首次验证

􀀩 日常工作中检查
7 \7 t/ L% G8 \. V( H, y& T9 T% Z4 E
􀀩 清洁程序变更后

􀀩 检查操纵者的工作质量

􀀩 产品、工艺或设备变化后
6 z0 W% b( d2 I1 B
􀀩 设备维修后
' U# S/ r2 k7 E9 R0 \
􀀩 周期性验证

: ?$ s$ [* O; `2 a                               
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: x* ?2 p' w* i5 Q2 F! ]% S设计一个全面合理的清洁验证             药群论坛

% j; S+ X4 M! l1 [2 D+ J' z􀀩 设备/器具清洗验证

* G% m; ~0 r* i􀀩 清洁周期验证

􀀩 存放周期验证

- l+ o! f4 V  p" [! @9 k􀀩 连续生产清洗验证                  药群论坛

' S5 t; a( ?/ A' L& C

残留是一定要考虑的问题，限度可以根据药典中二类溶解残留标准进行界定，同样要考虑与药品接触的表面积，棉签法是检测化学残留的首选办法，而溶剂要考虑目标残留的化学性质根据相似相容性进行选择，而淋洗法主要是为解决清洁溶剂残留而首选考虑，清洁剂是二氯甲烷，为什么要选择它作为清洁剂，就其本身毒性而言不建议使用。