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示差检测器是高效液相色谱仪上的一种检测器,配合液相色谱仪对样品进行分析检测。' S# Y% v3 a W% G" {% z
示差折光检测器是基于样品组分的折射率与流动相折射率有差异,当组分洗脱出来时会引起流动相折射率发生变化,这种变化与样品组分的浓度成正比,从而进行检测。, n. r% n7 B8 }% Q- s: y
一、示差折光检测器类型:* P& _" w; ]: q/ g
1、反射型:根据Fresnel定律。# C2 l R3 c- B
2、折射型:根据Snell定律。
7 s5 g' w4 ~9 n3、干涉型。2 {3 F$ | e+ b6 E" F
二、示差折光检测器特点:
. `+ [) I+ L# @9 F1、绝大多数物质的折射率与流动相都有差异,属于通用型检测器。5 B2 j R6 C9 n- U8 u: E! i
2、灵敏度低,对温度敏感,不能用于梯度洗脱。" C. j; X) F" a& G* u; `
三、示差折光检测器应用:
& N6 w/ ]7 J$ Z+ l/ z1、比较适合检测无紫外吸收的有机物,如高分子化合物、糖类和脂肪烷烃等。& n# ]# h- B4 e, k6 s% [0 T
2、在凝胶色谱仪中是必备的检测器。
7 m2 h, ~- Z! A3、在制备色谱仪中经常使用。& l1 s1 S& S- N+ s
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优点:对糖类检测灵敏度较高,其检测限可达10-8g/ml;稳定性好,操作方便。
; c m$ T( j) ` Y- m! M6 R缺点:该检测器对多数物质的灵敏度低(约10-5g/ml),通常不用于痕量分析;受环境温度、流动相组成等波动的影响较大,不适合梯度洗脱
# i4 M8 g7 U& l+ G2 ^; g' V- \5 Z$ v: p$ y# I0 u, q5 |9 k" `
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应用1 z/ n, D: k7 w+ s+ h3 E. B$ z0 I
% Z% Y. g: ` [, g5 X示差折光检测器主要受温度、流速以及流动相的种类等因素的影响,示差折光检测器是较难稳定,但是和仪器本身的硬件条件有问题,如能设法控制以下几个因素,情况会大有改善: (1)流动相一定要混匀,而且要充分脱气,最好用单元泵。 (2)有条件的话将溶剂瓶、柱温箱、检测器的光学单元温度控制在同一个温度,且最好高于室温5~10℃。不要将检测器放置在通风橱或是空调出风口处。 (3)环境温度不要变化太大,实验室最好门窗关闭,如果没有柱温箱那就把检测器温度调低一点。 (4)要把废液瓶和溶剂瓶放在示差检测器与泵以上位置,这样可以使样品池略有压力,有助于优化检测器性能。 此外,在安装示差检测器时,由于其流通池的反压估计为5bar,所以示差检测器在流路系统里必 须放在最后。如果还要在系统里增加一个检测器,必须放在示差检测器的前面,以防压力增大时损坏 示差检测器的流通池。同时建议在运输或搬迁示差检测器到其他场所时,流通池里最好装有异丙醇, 这是为避免在周围环境温度降低时使流通池破裂。
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