氨基酸组分分析 方法学验证

教各位老师：

        目前做一个多肽药物的氨基酸组分分析，用的是waters ACCQ 试剂包方法。有哪位老师做过这个项目的方法学验证，指导一下吧。是否还是以国家分析方法验证相关指导原则为基础？水解和衍生的回收率怎么设计？因为水解和衍生等前处理较复杂，有些项目的RSD是否可以考虑放宽，比如回收率？耐用性等还需要考察吗？因为这个是一个商业化的方法，是否可以省略某些验证项目？望各位老师赐教

氨基酸的手性纯度是广大肽类药物生产企业最为关心的事情,一根高效的手性分析柱,合适的检测条件的选择,适当的流动相体系的选择都是必不可少的重要手段.
/ R5 h9 H! ^( a$ w关于氨基酸手性分析方法的验证问题
1 b( ~. G  p. ]$ F9 q1 L    合适的检测条件指的是波长的选择问题,一般200-280nm都是可以选择的范围,但究竟哪种适合是有诸多讲究的. 首先,要保证被测主体样本可视,即有明显吸收峰. 其次,要能放大异构体的可观测度,由于样本中除了含有被观测主体外还存在其它杂质,为了避免其它干扰因素的影响,要尽量选择主体吸收高的波长,(做一个全波长扫描可以解决).
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    适当的流动相体系是指流动相中A,B的选择还有梯度等因素.通过不断尝试首先要把两种不同异构体能分开,其次,要尽量规避小杂质在体系中与被观测的异构体重合,造成分析误差.这种条件的选择工作量虽然较大,但只要耐心总可以找到一个比较适合的方法.
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) ?5 c  B: J: v0 x2 b0 \5 x: X    在解决了检测条件和流动相问题后,还不能直接用此对样本进行分析了,因为该方法尚未得到验证,其可靠性还存在疑问.验证的目的是要解决最低检测量和线性检测区间两个关键问题.

xiaoxiao 发表于 2017-11-20 09:29 PM
氨基酸的手性纯度是广大肽类药物生产企业最为关心的事情,一根高效的手性分析柱,合适的检测条件的选择,适当 ...

. K$ }9 ^4 d( T% `" p6 Y, o% q感谢这位老师回复。我们目前的方法是合适的，各个氨基酸分离度很好，也能重现，毕竟是waters公司研发并且商业化的一个方法。主要是对方法的考察和验证有疑问，水解和衍生的回收率怎么设计等等，希望能得到解答。